Effect of antigen doses on titer of antibody against a progesterone derivative in rabbits

Abstract

Objective of this study is to compare the effect of antigen doses on titer of antibody against a progesterone derivative in rabbits. Twelve New Zealand White rabbits were used and divided equally into 3 groups (Groups 1, 2 and 3). Three different doses of 11 alpha-hydroxyprogesterone-hemisuccinatebovine serum albumin were employed (Group 1 = 100, Group 2 = 250 and Group 3 = 500 micrograms/ injection). The immunization protocol was conducted with a 2-week interval for 4 times. Serum samples were collected from animals in each group and determined for antibody titer against a progesterone derivative by means of Indirect ELISA. The results showed significantly an increase of antibody titer throughout the study in all groups (P LT 0.01) and the highest difference of antibody titer was recorded in Group 3. The maximum mean antibody titer of this group was 1:36,000 at 8 weeks after the start of the immunization program. However, the mean of the antibody titer against a progesterone derivative throughout the study was not significantly different between groups (P GT 0.05). Furthermore, low antibody titer against bovine serum albumin was measured. In conclusion, the immunization protocol with 500 micrograms/injection of the progesterone derivative could lead to the highest antibody response with highly specific antibody in rabbits.

การศึกษาวิจัยครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อเปรียบเทียบผลของปริมาณสารแอนติเจนต่อระดับ แอนติบอดีต่อต้านอนุพันธ์ของฮอร์โมนโปรเจสเตอโรนในกระต่าย ทำการคัดเลือกกระต่ายพันธุ์ New Zealand White จำนวน 12 ตัว แบ่งออกเป็น 3 กลุ่ม กลุ่มละ 4 ตัว ฉีดกระตุ้นภูมิคุ้มกันด้วยสารแอนติเจน 11-hydroxyprogesterone-hemisuccinate-bovine serum albumin ที่ขนาด 100, 250 และ 500 ไมโครกรัม ต่อการกระตุ้นแต่ละครั้งในแต่ละกลุ่ม ตามลำดับ จำนวน 4 ครั้ง ห่างกันครั้งละ 2 สัปดาห์ เจาะเลือดเพื่อเก็บตัวอย่างซีรั่มก่อนนำมาวิเคราะห์หาระดับแอนติบอดีต่อต้านอนุพันธ์ของฮอร์โมนโปรเจสเตอโรนด้วยวิธี Indirect ELISA จากผลการทดลองพบว่า ระดับแอนติบอดีต่อต้านอนุพันธ์ของฮอร์โมนโปรเจสเตอโรนในแต่ละกลุ่มเพิ่มสูงขึ้นภายหลังจากการกระตุ้นภูมิคุ้มกันอย่างมีนัยสำคัญ (P น้อยกว่า 0.01) ทั้งนี้ระดับแอนติบอดีต่อต้านอนุพันธ์ของฮอร์โมนโปรเจสเตอโรนในกลุ่มที่ 3 มีแนวโน้มการเพิ่มของระดับแอนติบอดีสูงสุด โดยระดับแอนติบอดีเฉลี่ยสูงสุดในกลุ่มนี้มีค่าเท่ากับ 1:36,000 ในสัปดาห์ที่ 8 หลังจากการเริ่มการกระตุ้นภูมิคุ้มกัน อย่างไรก็ตามเมื่อเปรียบเทียบค่าเฉลี่ยของระดับแอนติบอดีต่อต้านอนุพันธ์ของฮอร์โมนโปรเจสเตอโรนของกระต่ายในแต่ละกลุ่ม เมื่อสิ้นสุดการทดลอง พบว่าไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (P มากกว่า 0.05) ขณะที่ระดับแอนติบอดีต่อต้าน bovine serum albumin ที่วัดได้อยู่ในระดับต่ำ ดังนั้นจากการศึกษาครั้งนี้ ้สามารถสรุปได้ว่า การตอบสนองต่อการฉีดกระตุ้นภูมิคุ้มกันด้วยอนุพันธ์ของฮอร์โมนโปรเจสเตอโรนในกระต่ายที่ขนาด 500 ไมโครกรัมต่อการกระตุ้นในแต่ละครั้งให้ผลการตอบสนองสูงสุด และแอนติบอดีที่ผลิตได้มีความจำเพาะสูงต่อแอนติเจนที่ใช้