Application of intradermal test to detect immune responses to a single E. coli vaccination in pigs

Abstract

Intradermal test (ID test) was conducted to detect immune responses to a single autogenous E.coli. vaccination in 6 weeks old pigs. A total volume of 0.1 ml antigen containing E.coli 10**(9) CFU/ml was injected intradermally at the base of the pigs'ear. Diameters of the corresponding wheal at the injection site were measured at 24, 48, and 72 hours later. For the screening test, 32 pigs have an average diameter of 3.77 mm. (0-7 mm.) at 24 hour. Diameters of the wheals decrease gradually after 48 and 72 hours. Six pigs (6/32) were positive for the ID test when using cut-off values of GT= 5 mm. The remaining 26 ID negative pigs were divided into 2 groups, vaccinated (n=13) and non-vaccinated (n=13) pigs. One shot of 2 ml of aluminum adjuvanted E.coli vaccine was injected at the pigs' neck muscle. The immune response was measured by ID test 2 weeks post-vaccination. At 24 hour, average wheal diameter of vaccinated pigs was 5.38 mm., and of non-vaccinated pigs was 2.53 mm. (p LT 0.01). Two pigs (2/13) in the non-vaccinated group have false positive ID test. This may be due repeated intradermal injections. They were received extra amounts of the antigen. Only one pig in the vaccinated group has negative ID test. The ID test is proved applicable with the sensitivity of 92 percent and specificity of 85 percent.

ทดสอบภูมิคุ้มกันที่ชั้นผิวหนัง (Intradermal test, ID test) เพื่อวัดการตอบสนองจากการทำ วัคซีนอีโคไลในสุกร โดยการฉีดอีโคไลแอนติเจนในปริมาณ 0.1 มิลลิลิตรเข้าที่ชั้นผิวหนังบริเวณโคนใบหูด้านหลังและอ่านผลจากการขยายใหญ่หรือบวมแดง ณ บริเวณที่ฉีด เมื่อเวลาผ่านไป 24, 48 และ 72 ชั่วโมง ในครั้งแรกทดสอบสุกรอายุ 6 สัปดาห์จำนวนทั้งหมด 32 ตัว เส้นผ่าศูนย์กลางเฉลี่ย ของตุ่มนูน ณ บริเวณที่ฉีดอ่านผลเมื่อ 24 ชั่วโมง มีค่าเท่ากับ 3.77 มิลลิเมตร (0-7 มิลลิเมตร) และขนาดของเส้นผ่าศูนย์กลางจะลดลงไปเรื่อยๆ เมื่อเวลา 48 และ 72 ชั่วโมง เมื่อใช้ค่ากำหนดมาตรฐาน (cut-off) ของเส้นผ่าศูนย์กลางที่ มากกว่าหรือเท่ากับ 5 มิลลิเมตร พบว่าสุกรให้ผลบวก 6/32 ตัว จากนั้นแบ่งสุกรที่ให้ผลการทดสอบเป็นลบจำนวน 26 ตัวออกเป็น 2 กลุ่ม คือกลุ่มที่ทำวัคซีน (n=13) และกลุ่มที่ไม่ได้ทำวัคซีน (n=13) โดยฉีดวัคซีนอีโคไลชนิดเดียวกันกับที่ใช้ทดสอบแอนติเจนในปริมาณ 2 มิลลิลิตรเข้ากล้ามเนื้อ 2 สัปดาห์ต่อมาทำการตรวจ ID test และอ่านผลที่ 24 ชั่วโมงหลังฉีดแอนติเจน พบว่าค่าเฉลี่ย เส้นผ่าศูนย์กลางของกลุ่มที่ทำวัคซีนมีค่าเท่า 5.38 มิลลิเมตร และกลุ่มที่ไม่ได้ทำวัคซีนมีค่าเท่ากับ 2.53 มิลลิเมตร สุกรจำนวน 2 ตัวในกลุ่มที่ไม่ได้ทำวัคซีนให้ผลบวกเทียม ทั้งนี้อาจเนื่องจากได้รับแอนติเจน มากเกินไปจากการทำ ID test ที่ผิดพลาดและต้องทำซ้ำ พบสุกรเพียงหนึ่งตัวในกลุ่มที่ทำวัคซีนให้ผลลบ การศึกษาในครั้งนี้พบว่า ID test สามารถนำมาประยุกต์ใช้เพื่อวัดการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันจากการทำวัคซีนในสุกรได้ ซึ่งมีความไวเท่ากับ 92 เปอร์เซ็นต์ และความจำเพาะเท่ากับ 85 เปอร์เซ็นต์