Efficacy of cellulose matrix card for preserving DNA of Mycoplasma gallisepticum at various temperatures and times

Abstract

Mycoplasma gallisepticum (MG) vaccines strain 6/85, F and ts-11 were dropped and preserved on cellulose matrix cards at various temperatures of 8 deg C, 25 deg C and 41deg C and times of 2 hr, 2 days, 10 days and 35 days, and analyzed comparing with no template controls for the presence of MG by PCR techniques. The results revealed the presence of DNA of all MG from the vaccine strains keeping at the various temperatures and times of experiments. No DNA of MG had been found on the any template control of cellulose matrix card. The cellulose matrix cards give advantages for preserving the DNA samples at the various temperatures and times without contamination between the samples by observing the absence of DNA on the non-template samples.

การเก็บและการวิเคราะห์ตัวอย่างเชื้อ มัยโคพลาสมา กัลลิเซพติกุม จากวัคซีน เสตรน 6/85 เสตรน เอฟ และเสตรน ทีเอส-11 เปรียบเทียบกับตัวอย่างควบคุมที่ไม่มีเทมเพลท ด้วยกระดาษเซลลูโลสเมทริกซ์ที่อุณหภูมิ 8 องศาเซลเซียส 25 องศาเซลเซียส และ 41 องศาเซลเซียส และเวลา 2 ชั่วโมง 2 วัน 10 วัน และ 35 วัน แล้วนำมาทำปฏิกิริยาพีซีอาร์ เพื่อตรวจหาการคงอยู่ของสารพันธุกรรมของมัยโคพลาสมา พบว่าสามารถตรวจพบสารพันธุกรรมจากตัวอย่างมัยโคพลาสมา ของวัคซีนทั้ง 3 เสตรนได้ โดยพบความการปรากฏของแถบสารพันธุกรรมในทุกตัวอย่างของวัคซีนและทุกสภาพที่ทำการทดสอบ แต่ไม่สามารถตรวจพบสารพันธุกรรมจากตัวอย่างควบคุมที่ไม่มีเทมเพลท ดังนั้นกระดาษเซลลูโลสเมทริกซ์ สามารถเก็บรักษาตัวอย่างสารพันธุกรรมได้ แม้มีความแตกต่างของอุณหภูมิระหว่าง 8-41 องศาเซลเซียส และระยะเวลาการเก็บรักษาตัวอย่างเปลี่ยนแปลงไปอย่างน้อย 35 วัน นอกจากนี้ยังไม่พบการปนเปื้อนระหว่างตัวอย่างที่เก็บบนกระดาษเซลลูโลสเมทริกซ์ โดยการสังเกตจากการตรวจไม่พบสารพันธุกรรมจากตัวอย่างควบคุมที่ไม่มีเทมเพลท